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                          激光共聚焦免疫熒光實(shí)驗

                          簡(jiǎn)要描述:激光共聚焦免疫熒光實(shí)驗是達為科生物的基礎服務(wù)項目之一,由細胞平臺經(jīng)驗豐富的實(shí)驗人員操作完成。

                          • 更新時(shí)間:2022-12-23
                          • 瀏覽次數:1693

                          詳細介紹

                             激光掃描共聚焦熒光顯微鏡(laser scanning confocal microscopy,LSCM)是一種利用計算機、激光和圖像處理技術(shù)獲得生物樣品三維數據、目前先進(jìn)的分子細胞生物學(xué)的分析儀器。它是在熒光顯微鏡成像的基礎上加裝了激光掃描裝置,利用計算機進(jìn)行圖像處理,使用紫外光或激光激發(fā)熒光探針,從而得到細胞或組織內部微細結構的熒光圖像,觀(guān)察細胞的形態(tài)變化或生理功能的改變。激光共聚焦已成為形態(tài)學(xué)、分子細胞生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、藥理學(xué)和遺傳學(xué)等領(lǐng)域中新的有力研究工具。

                           應用領(lǐng)域

                          在細胞及分子生物學(xué)基礎研究中的應用
                          激光掃描共聚焦顯微鏡應用照明針與檢測孔共軛成像,有效抑制了焦外模糊成像并可對標本各層分別成像,對活細胞行無(wú)損傷的“光學(xué)切片”這種功能也被形象的稱(chēng)為“顯微 CT”。CLSM 還可以對貼壁的單個(gè)細胞或細胞群的胞內、胞外熒光作定位、定性、定量及實(shí)時(shí)分析,并對胞內成分如線(xiàn)粒體、內質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、DNA、RNA、Ca2+、Mg2+、Na+ 等的分布、含量等進(jìn)行測定及動(dòng)態(tài)觀(guān)察,使細胞結構和功能方面的研究達到分子水平。
                          在腫瘤和抗癌藥物篩選研究中的應用
                          普通顯微鏡及電子顯微鏡,僅能對腫瘤相關(guān)抗原進(jìn)行定性分析,而 CLSM 則可對單標記或者多標記細胞、組織標本及活細胞進(jìn)行重復性很好的熒光定量分析,從而對腫瘤細胞的抗原表達、細胞結構特征,抗腫瘤藥物的作用及機制等方面定量化  。
                          在血液病學(xué)和醫學(xué)免疫學(xué)研究中的應用
                          激光掃描共聚焦顯微鏡觀(guān)察免疫細胞和系統,如樹(shù)突狀細胞、單核-吞噬細胞系統、自然殺傷細胞、淋巴細胞時(shí),在準確細胞定位的同時(shí)有效鑒定免疫細胞的性質(zhì)。
                          在大腦和神經(jīng)科學(xué)中的應用
                          激光掃描共聚焦顯微鏡分層掃描發(fā)現神經(jīng)軸突的內部結構連續性好。用激光掃描共聚焦顯微鏡能觀(guān)察到腦干組織中神經(jīng)軸突的正常走向,可排除在熒光顯微鏡下由此造成的一些病理假象  。并且激光掃描共聚焦顯微鏡能觀(guān)察神經(jīng)軸突的三維結構,因此應用 CLSM 有可能觀(guān)察到普通光鏡下未能發(fā)現的神經(jīng)組織的細微病變。
                          在眼科研究中的應用
                          利用激光掃描共聚焦顯微鏡可以觀(guān)察晶狀體,角膜、視網(wǎng)膜、虹膜和睫狀體的結構和病理變化。
                          在骨科研究領(lǐng)域中的應用
                          激光掃描共聚焦顯微鏡在骨科研究領(lǐng)域的應用現狀表明,CLSM在觀(guān)測骨細胞形態(tài)學(xué)研究、骨細胞特異性蛋白(骨鈣素)以及骨細胞之間的相互作用具有顯著(zhù)的優(yōu)勢。

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