穩轉細胞構建

簡(jiǎn)要描述：穩轉細胞構建實(shí)驗：用脂質(zhì)體轉染法或慢病毒侵染的方法將構建好的含靶基因的載體導入細胞，根據不同的基因載體中所含的抗性標志選用相應的藥物進(jìn)行篩選混合陽(yáng)性克隆。在陽(yáng)性混合克隆的基礎上，得到單細胞長(cháng)出的陽(yáng)性單克隆，繼而得到穩轉轉染細胞株。

更新時(shí)間：2022-12-23
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穩轉株構建實(shí)驗原理：

穩轉細胞株是指經(jīng)合適的藥物濃度進(jìn)行藥物篩選后，得到外源DNA穩定整合到宿主染色體，并可以長(cháng)時(shí)間表達外源目的基因的細胞。穩定表達細胞株彌補了瞬時(shí)感染(或轉染)實(shí)驗中外源基因表達時(shí)間短的缺陷，便于長(cháng)期觀(guān)察。穩轉細胞的篩選需根據不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應的藥物，常用的抗性篩選有嘌呤霉素(puromycin)、新霉素(neomycin)等。若實(shí)驗需求構建穩轉細胞株，我們建議通過(guò)慢病毒感染細胞進(jìn)行藥物篩選的方法，此方法較質(zhì)粒轉染可以更加有效的將外源基因整合入基因組，且整合位點(diǎn)處于轉錄相對活躍的區域，從而獲得更加高效表達外源基因的穩轉株細胞。

穩轉株構建實(shí)驗服務(wù)選擇：

1、穩轉株整體服務(wù)(克隆構建、病毒包裝穩轉株構建、檢測、單克隆細胞株篩選)；
2、穩轉株構建(穩轉株構建、檢測、單克隆細胞株篩選)。

穩轉株構建檢測服務(wù)說(shuō)明

1、穩轉細胞株以及陰性對照；

2、穩轉細胞株鑒定結果；

3、客戶(hù)可免費使用已有的細胞株，若庫中沒(méi)有的需要客戶(hù)提供；

4、客戶(hù)需提供代轉染的質(zhì)粒，也可委托代構建。

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